檢測(cè)認(rèn)證人脈交流通訊錄
環(huán)丙沙星快速檢測(cè)試劑盒
- 這真不是您需要的產(chǎn)品?
- 品 牌:
- 金萊生物
- 樣品制備:
牛奶不需要處理;肉、魚、蝦等需均質(zhì)、提取、離心、稀釋。
標(biāo)本的稀釋原則:
首先通過(guò)文獻(xiàn)檢索的方式了解待測(cè)樣本的大致含量,確定適當(dāng)?shù)南♂尡稊?shù)。只有稀釋至標(biāo)準(zhǔn)曲線的范圍內(nèi),檢測(cè)的結(jié)果才是準(zhǔn)確的。稀釋的過(guò)程中,應(yīng)做好詳細(xì)的記錄。最后計(jì)算濃度時(shí),稀釋了“N”倍,標(biāo)本的濃度應(yīng)再乘以“N”。
標(biāo)準(zhǔn)品的稀釋原則:2瓶,每瓶濃度為500 ng/ml,以樣品稀釋液做系列倍比稀釋,分別稀釋500 ng/ml,250 ng/ml, 125 ng/ml,62.5 ng/ml,31.2 ng/ml,15.6 ng/ml,7.8 ng/ml。樣品稀釋液直接作為標(biāo)準(zhǔn)濃度0 ng/ml。
辣根過(guò)氧化物酶標(biāo)記環(huán)丙沙星結(jié)合物的稀釋原則:
臨用前以辣根過(guò)氧化物酶標(biāo)記環(huán)丙沙星結(jié)合物稀釋液稀釋,稀釋前根據(jù)預(yù)先計(jì)算好的每次實(shí)驗(yàn)所需的總量配制(每孔50ul),實(shí)際配制時(shí)應(yīng)多配制0.1-0.2ml。如10ul辣根過(guò)氧化物酶標(biāo)記環(huán)丙沙星結(jié)合物加990ul辣根過(guò)氧化物酶標(biāo)記親和素稀釋液 的比例配制,輕輕混勻,在使用前一小時(shí)內(nèi)配制。
操作步驟
實(shí)驗(yàn)開始前,請(qǐng)?zhí)崆芭渲煤盟性噭?,試劑或樣品稀釋時(shí),均需混勻,混勻時(shí)盡量避免起泡。每次檢測(cè)都應(yīng)該做標(biāo)準(zhǔn)曲線。如樣品濃度過(guò)高時(shí),用樣品稀釋液進(jìn)行稀釋,以使樣品符合試劑盒的檢測(cè)范圍。
1. 加樣:分別設(shè)空白孔、標(biāo)準(zhǔn)孔、待測(cè)樣品孔??瞻卓准訕悠废♂屢?00ul,余孔分別加標(biāo)準(zhǔn)品或待測(cè)樣品100ul,注意不要有氣泡,加樣將樣品加于酶標(biāo)板孔底部,然后在所有孔中加入50 ul辣根過(guò)氧化物酶標(biāo)記環(huán)丙沙星結(jié)合物工作液。盡量不觸及孔壁,輕輕晃動(dòng)混勻。酶標(biāo)板加上蓋或覆膜,37℃反應(yīng)30分鐘-1小時(shí)。為保證實(shí)驗(yàn)結(jié)果有效性,每次實(shí)驗(yàn)請(qǐng)使用新的標(biāo)準(zhǔn)品溶液。
2. 溫育后,棄去孔內(nèi)液體,甩干,洗板5次,每次浸泡1-2分鐘,350ul/每孔,甩干。
3. 依序每孔加底物溶液90ul,37℃避光顯色(30分鐘內(nèi),此時(shí)肉眼可見(jiàn)標(biāo)準(zhǔn)品的前3-4孔有明顯的梯度藍(lán)色,后3-4孔梯度不明顯,即可終止)。
4. 依序每孔加終止溶液50ul,終止反應(yīng)(此時(shí)藍(lán)色立轉(zhuǎn)黃色)。終止液的加入順序應(yīng)盡量與底物液的加入順序相同。為了保證實(shí)驗(yàn)結(jié)果的準(zhǔn)確性,底物反應(yīng)時(shí)間到后應(yīng)盡快加入終止液。
5. 用酶聯(lián)儀在450nm波長(zhǎng)依序測(cè)量各孔的光密度(OD值)。 在加終止液后15分鐘以內(nèi)進(jìn)行檢測(cè)。
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