檢測認證人脈交流通訊錄
硝呋索爾ELISA試劑盒
- 這真不是您需要的產(chǎn)品?
- 品 牌:
- 金萊生物
- 一、 原理
本試劑盒采用間接競爭ELISA方法檢測水產(chǎn)和雞肉等組織樣本中的硝呋索爾,在微孔條上預(yù)包被上偶聯(lián)抗原,利用抗原與抗體的特異性免疫化學(xué)反應(yīng)的原理來進行的,樣本中的硝呋索爾和微孔條上預(yù)包被偶聯(lián)抗原競爭抗硝呋索爾衍生物抗體,加入酶標記物后,用TMB底物顯色,樣品中的硝呋索爾含量與樣品的吸光度值呈反比,與標準曲線比較即可得出硝呋索爾含量。
二、 試劑盒技術(shù)指標:
試劑盒靈敏度: 0.1ppb
樣本檢測下限:
組織、蜂蜜 0.2ppb
魚/蝦等水產(chǎn)品組織因存在一定的干擾,檢測下限為0.3ppb
回收率:
魚/蝦水產(chǎn)組織 90%±15%
蜂蜜/雞肉/肝臟樣本 80%±15%
交叉反應(yīng)率:
硝呋索爾代謝物 100%
呋喃唑酮代謝物 ﹤0.1%
呋喃妥因代謝物﹤0.1%
呋喃西林代謝物﹤0.1%
三、試劑盒組成
1.微量測試孔:96T/8孔
2.標準品液: 0ppb 0.1 ppb 0.3ppb 0.9ppb 2.7ppb 8.1ppb (1ml/瓶)
3.酶標記物 12ml
4.抗體工作液 7ml
5.底物緩沖液 7 ml
6.底物液 7 ml
7.終止液 7 ml
8.20倍濃縮洗滌液 50 ml
9.復(fù)溶液 50 ml
10.15.1mg衍生化試劑
四、 所用儀器、試劑
具備的儀器: 微孔酶標儀、打印機、均質(zhì)器 、氮氣吹干裝置、振蕩器、離心機、刻度移液管、天平(感量0.01g)
微量移液器: 單道20μl-200μl,100μl-1000μl、多道250μl
試 劑: 甲醇、氫氧化鈉、乙酸乙酯、正己烷、濃HCl、磷酸氫二鉀、鄰硝基苯甲醛、亞硝基鐵氰化鉀(K2Fe(CN)5·NO·3H2O)ZnSO4·7H2O
五、樣本前處理步驟
樣本處理前須知
處理任何樣本時,都必須注意:
(a)實驗中必須使用一次性吸頭,在吸取不同的試劑時要更換吸頭。
(b)實驗之前須檢查各種實驗器具是否干凈,必要時可對實驗器具進行清潔,以避免污染干擾實驗結(jié)果。
樣本前處理需配制:
1.衍生化試劑 稱15.1mg鄰硝基苯甲醛加甲醇10ml溶解(濃度10mM)
2.C液:(供奶樣用)稱12.5g亞硝基鐵氰化鉀用去離子水定溶至100ml。
D液:(供奶樣用)稱29.8g 硫酸鋅用去離子水溶解定溶至100ml。
3.0.1M K2HPO4 稱22.8g K2HPO4·3H2O
加去離子水溶解定溶至1L
4.1M HCl取8.6ml濃HCl加水定溶至100ml。
5.1M NaOH稱取4g NaOH加水定溶至100ml。
樣本的處理
(a) 肉樣或魚蝦
用均質(zhì)器均質(zhì)樣本,接(d)的描述方法
(b) 奶樣
1. 取出5ml的奶樣本到玻璃離心管中,分別加入C液和D液各250μl。
2. 用振蕩器充分混合樣本,用恒溫離心機4000r/min以上離心10min(4-12℃).若沒有恒溫離心機,則先將樣本降溫至大約8℃,然后離心。
3. 接(d)的描述方法
(c) 蜂蜜
1. 取1±0.05g樣本到離心管中。
2. 加入4ml的去離子水溶解,再加入0.5ml 1M HCl和100μl衍生化試劑,充分振蕩。
3. 接(d)第2步描述方法
(d)接上面的方法
1. 取1±0.05g的均質(zhì)樣本(肉樣/魚蝦)、牛奶的離心上清液1.1ml(相當(dāng)1ml奶樣),分別加入4ml的去離子水,0.5ml 1M HCl和100μl衍生化試劑,充分振蕩。
2. 置于56℃環(huán)境中孵育(2h)。
3. 分別加入5ml 0.1M K2HPO4, 0.4 ml 1M NaOH和5ml的乙酸乙酯,充分振蕩30s;
4. 在室溫下(20-25℃)4000r/min以上離心10min。
5. 取出2.5ml的乙酸乙酯到另一潔凈容器中于50℃氮氣/空氣吹干。
6. 用1ml正己烷溶解干燥物,用1ml已稀釋好的復(fù)溶液充分混合;在室溫下(20-25℃)4000r/min以上離心10min。
7. 取50μl下層相用于分析。
樣本稀釋倍數(shù):2
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