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蘇州金萊生物科技有限公司

檢測認證人脈交流通訊錄

己烯雌酚ELISA試劑盒

  • 這真不是您需要的產(chǎn)品？
  • 品　　牌：
  • 金萊生物
  • 主要規(guī)格：
  • 1000000T每盒
  • 用　　途：
  • 體外診斷
    • 一、 原理 本試劑盒采用間接競爭ELISA方法檢測水產(chǎn)和雞肉等組織樣本中的己烯雌酚，在微孔條上預(yù)包被上偶聯(lián)抗原，利用抗原與抗體的特異性免疫化學(xué)反應(yīng)的原理來進行的，樣本中的己烯雌酚和微孔條上預(yù)包被偶聯(lián)抗原競爭抗己烯雌酚的抗體，加入酶標記物后，用TMB底物顯色，樣品中的己烯雌酚含量與樣品的吸光度值呈反比，與標準曲線比較即可得出己烯雌酚含量。 二、 試劑盒技術(shù)指標： 試劑盒靈敏度： 0.1ppb 樣本檢測下限： 組織（蝦、魚） 0.1ppb 豬肉/肝 雞肉/肝 2ppb 飼料 20ppb 尿液 0.6ppb 回收率： 飼料 90±10% 組織 85±10% 尿液 80±10% 交叉反應(yīng)率： 己烯雌酚 100% 雙烯雌酚 35% 己烷雌酚 10% 己炔雌二醇 <0.1% 雌三醇 <0.1% 三、試劑盒組成 1．酶標板：96T/8孔 2．標準品液： 0ppb、0.1ppb、0.3ppb、0.9ppb、2.7ppb、8.1ppb（1.0mL/瓶） 3．酶標記物 12mL 4．抗體工作液 7mL 5．底物緩沖液 7 mL 6．底物液 7 mL 7．終止液 7 mL 8．20倍濃縮洗滌液 50 mL 用去離子水稀釋到1000 mL 9．20倍濃縮復(fù)溶液 12mL 用去離子水稀釋到240 mL 四、樣本前處理步驟 樣本處理前須知： 1．實驗中必須使用一次性吸頭，在吸取不同的試劑時要更換吸頭。 2．實驗之前須檢查各種實驗器具是否干凈，必要時可對實驗器具進行清潔，以避免污染干擾實驗結(jié)果。 樣本前處理需配制： 配液1：6M H3PO4 100mL 濃H3PO4（含量85%） 加去離子水150mL混合均勻 配液2：1M NaOH 4g NaOH 加去離子水100mL溶解 配液3：2M NaOH 8g NaOH 加去離子水100mL溶解 配液4：乙腈-丙酮 80mL 乙腈 加入丙酮20mL混合均勻 樣本的處理： （a）飼料樣本 1．稱取2±0.05g搗粹后的飼料樣本，加入8mL乙腈，振搖10min，15℃，3000g以上，離心10min； 2．取2mL上清液，60℃氮氣/空氣吹干； 3．加入0.5mL氯仿，渦動20s，加入2mL 1M NaOH，渦動30s，3000g以上，離心5min； 4．取1mL上清液，加入100μL 6M H3PO4，渦動5s； 不同樣本按如下方法稀釋： 配合料：取50μL，加入950μL的復(fù)溶液，渦動混勻，取50μL /孔用于檢測。 濃縮料/預(yù)混料：取25μL，加入975μL復(fù)溶液，渦動混勻，取50μL /孔用于檢測。取50μL用于分析。 配合料稀釋倍數(shù)：100 濃縮料、預(yù)混料稀釋倍數(shù)：200 （b）組織（雞肉/肝、豬肉/肝、蝦、魚） 1．稱取2±0.05g勻漿后的樣本，加入6mL乙腈-丙酮，振搖10min，15℃，3000g以上，離心10min。 2．取3mL上清液，60℃氮氣/空氣吹干。 加入0.5mL氯仿，渦動20s，加入2mL 2M NaOH，渦動30s，3000g以上，離心5min。 3．取1mL上清液，加入200μL 6M H3PO4，渦動5s。 4．加入3mL乙腈萃取，振蕩10min，室溫3000g以上，離心10min，取上層有機相， 60℃氮氣/空氣吹干。 用1mL復(fù)溶液溶解干燥的殘留物。 不同樣本按如下方法稀釋： 蝦魚：直接取50μL水相用于檢測。稀釋倍數(shù)：2 豬肉/肝、雞肉/肝：取50μL水相加入450μL稀釋后的復(fù)溶液，渦動均勻；取50μL用于檢測。 稀釋倍數(shù)：20 （c）尿液 1．取2mL尿液到離心管中，室溫3000g以上，離心10min，直至清亮； 2．移取1mL清亮尿液至離心管中，加入1mL　1M NaOH強烈振蕩5min； 3．加入100μL 6M H3PO4，渦動30 s； 4．再加入8mL氯仿進行萃取，振蕩10min。15℃，3000g以上，離心10min； 5．去掉上層的水相，取下層有機相4 mL，60℃氮氣/空氣吹干； 6．用3mL稀釋后的復(fù)溶液干燥的殘留物； 取50μL 用于分析。 樣本稀釋倍數(shù)：6
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