操作步驟:  
1）活化素Aelisa試劑盒使用前，將所有試劑充分混勻。不要使液體產(chǎn)生大量的泡沫，以免加樣時加入大量的氣泡，產(chǎn)生加樣上的誤差。  
2）根據(jù)待測樣品數(shù)量加上標(biāo)準(zhǔn)品的數(shù)量決定所需的板條數(shù)。每個標(biāo)準(zhǔn)品和空白孔建議做復(fù)孔。每個樣品根據(jù)自己的數(shù)量來定，能使用復(fù)孔的盡量做復(fù)孔。標(biāo)本用標(biāo)本稀釋液1：1稀釋后加入50ul于反應(yīng)孔內(nèi)。  
3）加取釋好后的標(biāo)準(zhǔn)品50ul于反應(yīng)孔、加入待測樣品50ul于反應(yīng)孔內(nèi)。立即加入50ul的生物素標(biāo)記的抗體。蓋上膜板，輕輕振蕩混勻，37÷育1小時。  
4）甩去孔內(nèi)液體，每孔加滿洗滌液，振蕩30秒，甩去洗滌液，用吸水紙拍干。重復(fù)此操作3次。如果用洗板機(jī)洗滌，洗滌次數(shù)增加一次。  
5）每孔加入80ul的親和鏈酶素-HRP，輕輕振蕩混勻，37÷育30分鐘。  
6）甩去孔內(nèi)液體，每孔加滿洗滌液，振蕩30秒，甩去洗滌液，用吸水紙拍干。重復(fù)此操作3次。如果用洗板機(jī)洗滌，洗滌次數(shù)增加一次。  
7）每孔加入底物A、B各50ul，輕輕振蕩混勻，37÷育10分鐘。避免光照。  
8）取出酶標(biāo)板，迅速加入50ul終止液，加入終止液后應(yīng)立尖定結(jié)果。  
9）在450nm波長處測定各孔的OD值。  
試劑和樣本的控制方法：  
一、試劑  
1.試劑的選擇：**明確要求要采用批批檢定的形式對ELISA試劑嚴(yán)格把關(guān)，我司嚴(yán)格按照**標(biāo)準(zhǔn)進(jìn)行生產(chǎn)，已獲得**承認(rèn)的“三證”，每一個產(chǎn)品都有對應(yīng)的生產(chǎn)批號，只要客戶提前下單，我們就能為您提供新批次的產(chǎn)品，不必?fù)?dān)心會有過期的試劑。我司的試劑，值得您選擇。  
2.試劑的準(zhǔn)備：先將試劑盒先從冰箱中拿出來，在室溫下放置20-30min后，再進(jìn)行測定，使試劑盒在使用前與室溫平衡，這樣做的目的能使反應(yīng)微孔內(nèi)的溫度較快地達(dá)到所需的溫度，以后面的測定需求。  
二、樣本  
1.內(nèi)源性干擾因素：包括類風(fēng)濕因子、補(bǔ)體、高濃度的非特異免疫球蛋白、異嗜性抗體、某些自身抗體等；  
類風(fēng)濕因子的控制方法：  
①用F(ab)2替代完整的IgG；  
②標(biāo)本用聯(lián)有熱變性IgG的固相吸附劑處理；  
③檢測抗原時，可用加入到標(biāo)本稀釋液中使RF降解；  
補(bǔ)體的控制方法：  
①用EDTA稀釋標(biāo)本；  
②56℃30min加熱血清使C1q滅活；  
2.外源性干擾因素：包括標(biāo)本溶血、細(xì)菌污染、保存時間過長或凝固不全等；  
控制方法：采血時規(guī)范操作，采集的血液勿用力震蕩，以防溶血；收集標(biāo)本時采用無菌試管，經(jīng)檢測后再低溫凍存；保存時間不宜過久，檢測時盡量采用新鮮標(biāo)本；對于凝固不全的血標(biāo)本可適當(dāng)加入抗凝劑，并放入37℃水中1h，待充分凝固后再離心分離血清。  
具有如下優(yōu)點(diǎn)：  
一、、靈敏、特異的抗體；  
二、穩(wěn)定的重復(fù)性和可靠性；  
三、吸附性能好，空白值低，孔底透明度高的固相載體；  
四、適營清、血漿、組織勻漿液、細(xì)胞培養(yǎng)上清液、尿液等等多種標(biāo)本類型；  
五、性價比非常好，節(jié)省實(shí)驗經(jīng)費(fèi)。  
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