western blot 是半定量研究蛋白質(zhì)表達(dá)的基礎(chǔ)實(shí)驗(yàn)，常應(yīng)用于對(duì)生物體內(nèi)信號(hào)通路、代謝途徑的研究，對(duì)其中起到關(guān)鍵作用的蛋白進(jìn)行研究，用于蛋白的定性和定量研究。

western blot 操作關(guān)鍵步驟

1.組織采集或細(xì)胞培養(yǎng)

2.樣品制備

3.SDS-PAGE

4.轉(zhuǎn)膜

5.一抗的孵育

6.二抗的孵育

7.顯影

Western blot實(shí)驗(yàn)樣品要求：

1.新鮮或正確保存的組織、細(xì)胞或蛋白樣品。

2.組織樣品：每份樣品約250~500mg;

3.細(xì)胞樣品：每份樣品約1×106~1×107 細(xì)胞數(shù);

4.蛋白樣品：裂解樣品總蛋白量>500μg/樣品，濃度≥2μg/μl。

冷凍樣品應(yīng)保存于-80℃，最好使用干冰運(yùn)輸?shù)竭_(dá)實(shí)驗(yàn)室。

Western blot實(shí)驗(yàn)報(bào)告呈現(xiàn)：

1.樣品處理流程;

2.實(shí)驗(yàn)操作步驟;

3.原始WB圖片;

4.軟件Image J初步分析灰度值表;

5.如有需要提供柱狀圖