分類 | 具體要求 |
菌液 | 1.提供>200µl左右過夜培養(yǎng)(12h)的菌液,于Eppendorf管中封口保存,防止交叉污染或滲漏(最好是5ml菌液,這樣我們更快處理您的樣品)。 2. 大量樣品測序,建議在一次性塑料培養(yǎng)皿固體培養(yǎng)基上穿刺培養(yǎng)。 3. 說明載體抗性類型,我們提供氨芐青霉素、羧芐青霉素、卡那霉素、氯霉素、四環(huán)素等抗生素;其余類型抗生素需自備。 |
PCR產(chǎn)物(已純化) | 1. PCR產(chǎn)物溶于ddH2O中(請勿溶解在TE溶液中)。 2. 濃度大于50ng/µl,體積大于10µl(僅限一個反應,每增加一個反應,多提供5ul)。 3. 電泳檢測條帶專一。 |
PCR產(chǎn)物(未純化) | 1. 片段大于100bp。 2. 請?zhí)峁?0-50µl PCR擴增產(chǎn)物(20ng/ul,總量>600ng),取3µl樣品,應該能夠清晰的分辨出目的條帶 |
質(zhì)粒 | 1. 質(zhì)粒溶于ddH2O中(請勿溶解在TE溶液中),電泳檢測濃度大于50ng/µl;體積大于10µl(僅限一個反應,每增加一個反應,多提供5ul)。 2. 需注明載體和插入目的片段長度、以及測序要求。 |
引物 | 1. 濃度不低于3.2pmol/µl,溶液體積大于10µl;(反應數(shù)多需多提供,正常情況下,按2ul/個反應提供)。 2. 隨機引物(RAPD引物)和簡并引物,混合引物以及引物長度不足17bp不能用于測序。 3. 引物長度一般在18-23bp比較適合測序,特異性高。 4. 盡可能提供引物全序列、PCR退火溫度,以供參考。 |