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天津百浩生物科技有限公司

檢測認(rèn)證人脈交流通訊錄

BCA蛋白濃度測定試劑盒

  • 這真不是您需要的產(chǎn)品？
  • 品　　牌：
  • 主要規(guī)格：
  • 500T/5000T
  • 用　　途：
  • 蛋白濃度測定
    • 貨　　號： P0130 名　　稱： BCA蛋白濃度測定試劑盒 規(guī)　　格： 500微孔 價　　格： 280.00 CAS　　#： BCA蛋白濃度測定試劑盒使用說明 試劑盒組成 包裝(500微孔) 保存 BCA試劑 100ml 2-8℃ Cu試劑 3ml 2-8℃ PBS稀釋液 30ml 2-8℃ BSA蛋白標(biāo)準(zhǔn) (5mg/ml BSA) 1ml -20℃ 本試劑盒自訂購之日起一年內(nèi)有效。本試劑盒用于酶標(biāo)板或者200ul比色皿時可做500孔。當(dāng)使用2ml比色皿時可做50孔，如果是1ml比色皿時可做100孔。 產(chǎn)品簡介 堿性條件下，蛋白將Cu2+還原為Cu+， Cu+與BCA試劑形成紫顏色的絡(luò)合物，測定其在562nm處的吸收值，并與標(biāo)準(zhǔn)曲線對比，即可計算待測蛋白的濃度。常用濃度的去垢劑SDS，Triton X-100，Tween不影響檢測結(jié)果，但受螯合劑(EDTA，EGTA)、還原劑（DTT，巰基乙醇）和脂類的影響。實驗中，若發(fā)現(xiàn)樣品稀釋液或裂解液本身背景值較高，可試用Bradford蛋白濃度測定試劑盒。 使用說明 一，微孔酶標(biāo)儀法 1. 配制工作液: 根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)品和樣品數(shù)量，按50體積BCA試劑加1體積Cu試劑（50:1）配制成BCA工作液，充分混勻(混合時可能會有渾濁，但混勻后就會消失)。BCA工作液室溫24小時內(nèi)穩(wěn)定。 2. 稀釋標(biāo)準(zhǔn)品：取10微升BSA標(biāo)準(zhǔn)品用PBS稀釋至100微升（樣品一般可用PBS稀釋），使終濃度為0.5mg/ml。將標(biāo)準(zhǔn)品按0, 2, 4，6，8, 12, 16, 20微升加到96孔板的蛋白標(biāo)準(zhǔn)品孔中，加PBS補足到20微升。 3. 將樣品作適當(dāng)稀釋（最好多做幾個梯度，如作2倍、4倍、8倍稀釋），加20微升到96孔板的樣品孔中。由于移液器在取小量時的誤差，標(biāo)準(zhǔn)線前面的點可能不很準(zhǔn)確，所以盡可能的讓樣品點落在標(biāo)準(zhǔn)線1/2后。 4. 各孔加入200微升BCA工作液，37℃放置15-30分鐘。用酶標(biāo)儀測定A562nm，根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)曲線計算出蛋白濃度。使用溫箱孵育時，應(yīng)注意防止因水分蒸發(fā)影響檢測結(jié)果。 二，分光光度計法、 如沒有酶標(biāo)儀，可用分光光度計在離心管中混勻后加入比色皿中比色。 步驟如下： 1．配制工作液: 根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)品和樣品數(shù)量，按50體積BCA試劑加1體積Cu試劑（50:1）配制成BCA工作液，充分混勻(混合時可能會有渾濁，但混勻后就會消失)。BCA工作液室溫24小時內(nèi)穩(wěn)定。 2， 稀釋標(biāo)準(zhǔn)品：取100微升BSA標(biāo)準(zhǔn)品用PBS稀釋至1ml（樣品一般可用PBS稀釋），使終濃度為0.5mg/ml。 3， 取八支（或者更多）5ml離心管，標(biāo)讓號，按下表加入試劑。 離心管號 1 2 3 4 5 6 7（樣品管1） 8（樣品管2） 9（樣品管3） 標(biāo)準(zhǔn)蛋白BSA 0 40ul 80ul 120ul 160ul 200ul 200ul適當(dāng)稀釋的樣品1 200ul適當(dāng)稀釋的樣品2 …… PBS 200ul 160ul 120ul 80ul 40ul 0 0 0 0 BCA工作液 2ml 2ml 2ml 2ml 2ml 2ml 2ml 2ml 4， 37℃放置15-30分鐘。用分光光度計測562nm處吸光值，根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)曲線計算出蛋白濃度。
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    江進

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