制備型電泳 AE-6750S 用途 蛋白質(zhì)的分離•回收 從細胞•菌中分離目標蛋白 從混合溶液中分離目標蛋白 新發(fā)現(xiàn)蛋白質(zhì)的回收 要求分離能力時 必須的難溶性物質(zhì)為表面活性劑時 DNA的分離•回收 限制性酶片段的回收 PCR產(chǎn)物的回收 Prepforesis S制備電泳系統(tǒng)的特長 ·回收部分的構(gòu)造最大限度的防止污染(特長一) ·特有的回收方式「斷續(xù)-空氣置換送液方式」(特長二) ·利用聚丙酰胺的高分離效果(優(yōu)于層析的分離效果) ·自動控制,操作簡單 ·電泳槽,電源,泵,冷卻用熱交換器,控制部分一體化設(shè)計 特長的詳細介紹 回收部的構(gòu)造 傳統(tǒng)的制備電泳裝置,回收部使用透析膜區(qū)分下部電泳緩沖液和目標成分,但目標成分會在電場作用下吸附在透析膜上,引起污染.而AE-6750S的回收部設(shè)計成兩個圓柱凝膠上下相挾的空間形式.通電后,電泳泳動分離出的目的成分溶于回收部中填充的回收液中.但目的成分不會吸附在回收部下部的凝膠上. 「斷續(xù)-空氣置換送液方式」 傳統(tǒng)的制備電泳分離裝置中,在電場的作用下,目的成分會吸附在回收部下部的透析膜上,所以必須使回收液連續(xù)快速流動來回收目的成分.所以目的成分會被回收液稀釋. AE-6750采用的是回收液非循環(huán)方式.回收時,電泳也一同停止,回收液經(jīng)泵送至收集器回收,同時,向回收部注入一段時間空氣,使回收部保持空的狀態(tài).回收完成后,再由泵注入新的回收液,所以這一劃時代的先進方法被稱為「斷續(xù)-空氣置換送液方式」.因為無需使用太多回收液,所以最大限度的防止目的成分被稀釋. 制備電泳Prepforesis S 的操作流程如下: 根據(jù)預備電泳(垂直板電泳)的條帶判定是否能分離 ① 預備電泳: ↓ 判定可以分離時,摸索確定分離條件 樣品濃度(分離的最適濃度和最后確認實驗時的必須濃度) 凝膠濃度(參考預備電泳,摸索分離時的最適濃度) 電泳條件 ↓ ② Prepforesis S 進行樣品分離前,必須進行以下工作 泳動準備 樣品,圓柱凝膠,緩沖液,回收液的配置 安裝電泳槽及電泳緩沖液的預備恒溫 分離條件的設(shè)定 向配管及回收部中添加回收液 添加樣品 ↓ ③ 開始自動分離: 添加樣品后,按照設(shè)定的條件進行自動分離,回收 ↓ ④ 分離成分確認: 經(jīng)制備電泳Prepforesis S系統(tǒng)回收的分離成分,用Mini垂直板電泳或用活性測定來確認 ↓ 目的成分可以確認時,該分離成分可以用于活性測定,質(zhì)量分析等后續(xù)實驗 主要技術(shù)指標: 圓柱膠的體積: 內(nèi)徑 16 mm/ 長 8mm 支架/膠濃度:PAGE膠 6% - 20% 樣品量:2.0 mg (質(zhì)量) / 2.0 ml (體積) 回收部體積:0.8 ml 緩沖液量:1000 ml 循環(huán)泵流量:650 ml/分鐘 (泵工作時間 1–999分鐘) 分離時間:1–999 分鐘 (1 分鐘 / 檔) 收集器輸出信號:MAKE接點/open collector 400 ms (step式信號) 15mA 電源輸出:恒定電流 5 mA , 10mA , 15mA , 20 mA , 25mA , 30mA , 40mA可變換輸出(梯度、程序);異常輸出自檢功能 條件設(shè)定:輸出電流值 / 延遲時間 / 分離循環(huán)中的泳動通電時間 / 溶液回收時間/回收溶液充填時間 / 分離階段數(shù) 使用溫度范圍:5 - 65℃ 控制內(nèi)容顯示:熒光LED顯示板 40 行 × 20 字 尺寸 質(zhì)量:260 (w) × 380 (l) × 420 (h) mm 11Kg 大鼠肌肉抽提物經(jīng)制備電泳Prepforesis S系統(tǒng),用SDS-PAGE分離回收 (制備電泳Prepforesis S的電泳條件) 樣品:大鼠肌肉抽提物 濃縮膠組成:4.5%PAGE Tris-HCL-SDS 緩沖液( pH 6.8 ) 分離膠組成:12.5%PAGE Tris-HCL-SDS 緩沖液( pH8.8 ) 分離膠長:20 mm 電泳用緩沖液:Tris-Gly-SDS 緩沖液 回收用緩沖液:Tris-HCL 緩沖液( pH8.8 ),20%蔗糖 回收液量:0.8 ml / 組分 分畫時間:5 分鐘 通電:15 mA恒定電流 泳動時間:10 小時 緩沖液溫度:20℃ |