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檢測(cè)認(rèn)證人脈交流通訊錄

篤瑪 卡爾費(fèi)休含吡啶 產(chǎn)品說明書

  • 這真不是您需要的產(chǎn)品?
  • 品  牌:
  • DM
  • 主要規(guī)格:
  • AR500ml
  • 用  途:
  • 科研
    • 卡爾費(fèi)休含吡啶 驗(yàn)準(zhǔn)備 在收集樣本前都必須有一個(gè)完整的計(jì)劃,必須清楚要檢測(cè)的成份是否足夠穩(wěn)定。對(duì)收集后當(dāng)天就進(jìn)行檢測(cè)的樣本,及時(shí)儲(chǔ)存在4℃?zhèn)溆谩?duì)于隔天再檢測(cè)的樣本,及時(shí)分裝后凍存在-20℃?zhèn)溆茫袟l件的,最好-70℃凍存?zhèn)溆?。?biāo)本應(yīng)避免反復(fù)凍融。 液體類標(biāo)本: 包括血清、血漿、尿液、胸腹水、腦脊液、細(xì)胞培養(yǎng)上清等。 1. 血清: 室溫血液自然凝固10-20分鐘后,離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應(yīng)再次離心。 2. 血漿: 應(yīng)根據(jù)標(biāo)本的要求選擇EDTA、檸檬酸鈉或肝素作為抗凝劑,混合10-20分鐘后,離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應(yīng)再次離心。 3. 尿液: 用無菌管收集。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應(yīng)再次離心。胸腹水、腦脊液參照此實(shí)行。 4. 細(xì)胞培養(yǎng)上清: 檢測(cè)分泌性的成份時(shí),用無菌管收集。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。 5. 培養(yǎng)細(xì)胞 檢測(cè)細(xì)胞內(nèi)的成份時(shí),用PBS(PH7.2-7.4)稀釋細(xì)胞懸液,細(xì)胞濃度達(dá)到100萬/ml左右。通過反復(fù)凍融或加入組織蛋白萃取試劑,以使細(xì)胞破壞并放出細(xì)胞內(nèi)成份。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應(yīng)再次離心。 6. 組織標(biāo)本 切割標(biāo)本后,稱取重量。加入一定量的PBS,PH7.4。用液氮迅速冷凍保存?zhèn)溆?。?biāo)本融化后仍然保持2-8℃的溫度。加入一定量的PBS(PH7.4),或組織蛋白萃取試劑, 用手工或勻漿器將標(biāo)本勻漿化。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。分裝后一份待檢測(cè),其余冷凍備用。 篤瑪代測(cè)服務(wù): 技術(shù)服務(wù)內(nèi)容: 1、雙抗體夾心法檢測(cè)抗原 2、間接法檢測(cè)抗體 3、為客戶提供各種ELISA技術(shù)進(jìn)行樣本檢測(cè)。 寄標(biāo)本時(shí)需注明以下情況:1、標(biāo)本編號(hào);2、所測(cè)項(xiàng)目;3、是否做復(fù)孔;4、聯(lián)系方式;5、實(shí)驗(yàn)后標(biāo)本是否寄回。 卡爾費(fèi)休含吡啶 實(shí)驗(yàn)步驟: 1.包被抗原:稀釋液pH 9.6 碳酸鹽緩沖液,多肽濃度2ug/ml,0.1ml/孔,4oC過夜,洗凈。 2.1%BSA (pH 9.6 碳酸鹽緩沖液) 封閉,0.1ml/孔,37oC1h,洗凈。 3.稀釋抗血清(可稀釋不同濃度) 0.1ml/孔,37oC 30分鐘,洗凈。 4.稀釋辣根過氧化物每標(biāo)記的二抗0.1ml/孔,37oC 40分鐘,洗凈。 5.顯色:TMB顯色 A液:四甲基聯(lián)苯胺10mg 溶于DMF1ml中,再用pH5.0檸檬酸緩沖液稀釋100倍. B液:5ul加蒸餾水12.5ml 。 終止液:2N硫酸 A液、B液各一滴,比光顯色10分鐘,終止液一滴。 6.450nm 波長測(cè)OD值 卡爾費(fèi)休含吡啶 樣品收集、處理及保存方法 1. 血清:使用不含熱原和內(nèi)毒素的試管,操作過程中避免任何細(xì)胞刺激,收集血液后,3000轉(zhuǎn)離心10分鐘將血清和紅細(xì)胞迅速小心地分離。 2. 血漿:EDTA、檸檬酸鹽或肝素抗凝。3000轉(zhuǎn)離心30分鐘取上清。 3. 細(xì)胞上清液:3000轉(zhuǎn)離心10分鐘去除顆粒和聚合物。 4. 組織勻漿:將組織加入適量生理鹽水搗碎。3000轉(zhuǎn)離心10分鐘取上清。 5. 保存:如果樣本收集后不及時(shí)檢測(cè),請(qǐng)按一次用量分裝,凍存于-20℃,避免反復(fù)凍融,在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍。 溫馨提示:不可用于臨床治療。

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